in vitro 眼刺激性試験 (OECD TG492)
in vitro 眼刺激性試験 (OECD TG492)は、眼刺激性または重度の眼損傷性として分類および表示する必要のない化学物質を同定するための試験法です。
これまで眼刺激性の評価には動物実験が用いられてきましたが、近年では、動物を使用しない安全性評価の重要性が世界的に高まっており、それに伴い動物実験代替法の開発が進められています。
LabCyte CORNEA-MODEL24はヒト正常角膜上皮細胞を用いたヒト3次元培養角膜上皮です。
DSTCではLabCyte CORNEA-MODEL24を用いた眼刺激性試験を受託しており、化学物質のほか、医薬部外品や化粧品などの評価も行っております。
ヒト細胞を用いているため種差がなく、データのバラツキが少ないことから、再現性の高い試験結果が得られます。
LabCyte CORNEA-MODEL24を用いた in vitro 眼刺激性試験の試験概要
試験日程例 (被験物質が液体の場合)
試験日程例 (被験物質が粉体の場合)
被験物質必要量
液体: 1 mL
粉体: 1 g判定基準
| 生細胞率 | 判定 |
|---|---|
| 生細胞率 ≦ 40% |
予測不能
(カテゴリー1もしくは2)
|
| 生細胞率 ＞ 40% | 区分外 |
試験方法
液体の場合
前培養を行った培養組織に被験物質を50 µL適用します。
適用60秒後にDPBS (-) で培養カップの内側を洗浄し、後培養をおこないます。
後培養後、WST-8反応液に入れ反応させます。
反応液の吸光度を測定し、陰性対照群の吸光度を生細胞率100%として、試料の生細胞率を算出します。
生細胞率が40%以下の場合は予測不能 (刺激性)、40%よりも高い場合は区分外と判断します。
粉体の場合
前培養を行った培養組織に被験物質を10 mg適用し、後培養を行います。
後培養後、DPBS (-) で培養カップの内側を洗浄します。
WST-8反応液に入れ反応させます。
反応液の吸光度を測定し、陰性対照群の吸光度を生細胞率100%として、試料の生細胞率を算出します。
生細胞率が40%以下の場合は予測不能 (刺激性)、40%よりも高い場合は区分外と判断します。
反応液を入れた96ウエルプレート例
【関連ページ】代替法
【関連ページ】in vitro 皮膚刺激性試験 (OECD TG439)
